Преімплантаційне генетичне тестування ембріонів (PGT)

Преімплантаційне генетичне тестування ембріонів (PGT) — це сучасний метод, пов'язаний із технологіями штучного запліднення, який дає змогу генетично дослідити ембріони ще до їх перенесення в матку, тобто до ембріотрансферу. Мета полягає в тому, щоб обрати ембріон із найвищим шансом на здоровий розвиток і знизити ризик викидня або передачі спадкового захворювання наступним поколінням.

Преімплантаційне генетичне тестування (PGT)

Преімплантаційне генетичне тестування ембріонів — сучасний метод, що поєднує асистовану репродукцію з клінічною генетикою, який дає змогу виявити генетичні відхилення у ембріонів на ранньому етапі розвитку та допомагає знизити ризик невдалого ембріотрансферу, викидня або народження дитини з серйозним генетичним захворюванням.

Прокрутити вниз
Преімплантаційне генетичне тестування ембріонів

Принцип ЕКЗ-лікування з преімплантаційним генетичним тестуванням ембріонів

Преімплантаційне генетичне тестування ембріонів

Культивування та підготовка ембріона до біопсії

Після запліднення яйцеклітин ембріони, що утворилися, культивуються в суворо контрольованих лабораторних умовах до 5–6-го дня, коли в оптимальному випадку вони розвиваються до стадії так званої хетчингової (вилуплюваної) бластоцисти — ідеальної фази для безпечного забору клітин (біопсії), призначених для преімплантаційного генетичного тестування.

Прокрутити вниз

Асистований хетчинг як частина культивування

З метою досягнення якомога більшої кількості ембріонів на цій стадії на 3-й день культивування у всіх ембріонів ми проводимо асистований хетчинг. Це цілеспрямоване лазерне втручання сприяє природному вивільненню ембріона із захисної оболонки (zona pellucida) і створює відповідні умови для щадної та безпечної біопсії.

Прокрутити вниз
Преімплантаційне генетичне тестування ембріонів
Преімплантаційне генетичне тестування ембріонів

Щадний забір клітин для генетичного аналізу

Біопсія — це лабораторна процедура, під час якої за допомогою мікропіпетки та лазера щадно забирається з бластоцисти 5–10 клітин трофектодерми, тобто основи плаценти й ембріональних оболонок, але не самого зародка (так звана ембріобласт). Отже, втручання жодним чином негативно не впливає на подальший розвиток ембріона. Отриманий матеріал переноситься в мікропробірку і в генетичній лабораторії піддається ретельному генетичному аналізу відповідно до обраного типу генетичного дослідження:

Прокрутити вниз

Після біопсії ембріони заморожуються дуже щадним методом вітрифікації

Генетичне дослідження ембріонів триває 3–5 тижнів (залежно від типу генетичного дослідження). Після його завершення для кріоембріотрансферу (КЕТ) відбирається ембріон, у якого не були виявлені генетичні аномалії, що відстежуються обраним методом.

Етапи генетичного аналізу

1. Підготовка ДНК із забраних клітин

З невеликої кількості клітин (близько 5–10) у лабораторії готується достатня кількість ДНК для аналізу всього геному ембріона (тобто всієї його генетичної інформації). Цей крок називається цілогеномною ампліфікацією і дає змогу провести детальне дослідження навіть із дуже малого зразка ембріона.

2. Комплексний і цільовий генетичний аналіз ембріонів

Для генетичного дослідження ембріонів використовуються різні молекулярно-генетичні методи залежно від типу та мети дослідження. Для їх правильного налаштування необхідно мати каріотипи (дослідження кількості та структури хромосом) батьків, а також генетичний звіт, що описує досліджувану моногенну мутацію (генетичне відхилення в одному конкретному гені).

Молекулярно-генетичні методи, що використовуються для дослідження ембріонів

NGS (секвенування нового покоління)

служить для загальної оцінки генетичного стану ембріона. Дає змогу дослідити кількість хромосом і виявити також структурні аномалії хромосом, які можуть впливати на подальший розвиток ембріона.

Karyomapping

це непрямий метод, який використовується переважно при моногенних захворюваннях у межах PGT-M. За допомогою порівняння з референсними зразками ДНК батьків та інших членів родини він дає змогу з'ясувати, чи успадкував ембріон досліджуване генетичне захворювання, і водночас включає контроль кількості хромосом, як при PGT-A.

Пряма детекція мутації

це цільове дослідження, під час якого аналізується конкретний варіант мутації в досліджуваному гені. Найчастіше використовуються методи PCR і секвенування, наприклад секвенування за Сенгером, які точно визначають наявність або відсутність відповідної мутації в ембріоні. Пряма детекція мутації використовується насамперед у випадках, коли неможливо отримати референсні зразки ДНК родичів, необхідні для непрямих методів, які з діагностичного погляду є надійнішими.

3. Вибір генетично здорового ембріона

На основі результатів лабораторія рекомендує, який ембріон має найвищий шанс на успішну вагітність і здоровий розвиток. Ембріони тим часом безпечно заморожуються, а їх перенесення відбувається лише після оцінки результатів.

Чому PGT є корисним

Підвищує шанс на успішний трансфер і вагітність

Знижує ризик викиднів, спричинених генетичними помилками

Допомагає запобігти передачі спадкових захворювань.

Типи PGT залежно від того, яке генетичне відхилення потрібно ідентифікувати

PGT-A

Преімплантаційне генетичне тестування анеуплоїдій

PGT-A — це генетичне дослідження, яке служить для оцінки правильної кількості хромосом у клітинах ембріона ще до його перенесення в матку. Для його виконання достатньо досліджених каріотипів батьків.

Кожна клітина людського тіла, крім яйцеклітини та сперматозоїда, містить 46 хромосом. Якщо ембріон має зайву хромосому або, навпаки, якоїсь хромосоми йому бракує, тобто йдеться про анеуплоїдію, це може призвести до невдалого прикріплення ембріона, повторних викиднів або виникнення генетично зумовлених захворювань, наприклад синдрому Дауна, Едвардса або Патау.

PGT-A призначене насамперед для:

  • жінок старшого репродуктивного віку, понад 35 років,
  • пар із повторними невдалими ембріотрансферами,
  • пар із повторними викиднями або народженням дитини з вадою розвитку,
  • чоловіків із тяжким порушенням спермограми, тератозооспермією, після хіміотерапії або після хірургічного забору сперматозоїдів (TESE).

Основні переваги PGT-A

PGT-A дає змогу виявити числові хромосомні відхилення ще до ембріотрансферу та обрати ембріон із найвищим потенціалом до імплантації й здорового розвитку. Завдяки цьому воно суттєво знижує ризик викидня та підтримує ефективніше й більш цільове лікування безпліддя.

PGT-A PLUS

Розширене преімплантаційне генетичне тестування анеуплоїдій

PGT-A PLUS — це розширена форма преімплантаційного генетичного тестування анеуплоїдій, яка, крім визначення правильної кількості хромосом в ембріона, надає також інформацію про походження виявлених відхилень.

Що PGT-A PLUS дає додатково порівняно зі стандартним PGT-A:

  • визначає батьківське походження хромосомних відхилень, тобто чи походить генетичне відхилення з яйцеклітини або зі сперматозоїда,
  • допомагає розрізнити, чи генетична помилка була присутня вже в статевих клітинах, тобто в яйцеклітині або сперматозоїді, чи виникла лише під час раннього розвитку ембріона.

Генетичний аналіз із використанням референсного зразка ДНК

На відміну від стандартного PGT-A, яке досліджується методом NGS, тобто секвенуванням нового покоління, PGT-A PLUS аналізується за допомогою технології SNP-array, тобто аналізу однонуклеотидних поліморфізмів. Цей метод дає змогу відстежувати спадкові генетичні маркери та визначити, чи виявлені хромосомні відхилення походять з яйцеклітини або зі сперматозоїда. Тому для дослідження необхідний референсний зразок ДНК одного з батьків, який служить для точного з'ясування походження генетичної зміни.

Основна перевага PGT-A PLUS

Метод PGT-A PLUS надає розширену генетичну інформацію, особливо у пар із повторними невдачами лікування, і підтримує індивідуалізований підхід до лікування безпліддя. Він дає змогу краще зрозуміти походження виявлених генетичних відхилень і на основі цих даних цільово скоригувати подальший лікувальний план, наприклад розглянути використання донорських яйцеклітин або сперматозоїдів у наступному циклі.

PGT-SR

Преімплантаційне генетичне тестування структурних аберацій

PGT-SR — це генетичне дослідження ембріонів, спрямоване на виявлення структурних відхилень хромосом, при яких відбувається заміна, переміщення або втрата частин хромосом. Мета полягає в тому, щоб обрати ембріон із повним і правильно впорядкованим каріотипом, який має найвищий шанс на успішну імплантацію, тобто прикріплення, і здоровий розвиток.

PGT-SR призначене для пар, у яких в одного з партнерів було виявлено балансоване, тобто врівноважене, структурне хромосомне відхилення, наприклад транслокацію або інверсію, яке не впливає на його здоров'я, але впливає на його репродукцію. Такі відхилення призводять до того, що частіше утворюються репродуктивні клітини (яйцеклітини/сперматозоїди) з небалансованою перебудовою, що спричиняє виникнення ембріонів із незбалансованою генетичною інформацією, коли частина генетичної інформації відсутня або є в надлишку. Такі ембріони мають вищий ризик спонтанних викиднів або вроджених вад розвитку.


Генетичний аналіз на основі каріотипу

PGT-SR використовує для виявлення структурних хромосомних перебудов у ембріонів метод NGS, тобто секвенування нового покоління. Для генетичного аналізу необхідний каріотип того з батьків, у якого точно ідентифіковано аномалію; саме на цю аномалію потім спрямовується дослідження ембріонів.

Основні переваги PGT-SR

PGT-SR дає змогу обрати ембріон без структурних хромосомних аномалій, знижує ризик невдалої вагітності та викидня і водночас підтримує цільовий та індивідуалізований підхід до лікування безпліддя.

PGT-M

Преімплантаційне генетичне тестування моногенних захворювань

PGT-M — це найдетальніше генетичне дослідження ембріонів, яке служить для виявлення конкретних спадкових захворювань, спричинених зміною, тобто мутацією, в одному гені. Цей метод дає змогу обрати ембріони, які не несуть досліджуване генетичне захворювання, ще до їх перенесення в матку.

PGT-M призначене для пар:

  • у яких відоме генетичне захворювання в родині, наприклад мутації, пов'язані з високим ризиком розвитку раку — BRCA1, BRCA2, хвороба Гантінгтона або міотонічна дистрофія,
  • де партнери є носіями спадкового захворювання, наприклад муковісцидозу, спінальної м'язової атрофії або фенілкетонурії,
  • які мають підвищений ризик передачі конкретної генетичної мутації своїй дитині, наприклад ризик повторення випадково виниклої мутації і в наступного нащадка, наприклад нейрофіброматозу.

Генетичний аналіз за допомогою karyomapping із референсними зразками ДНК

Забрані ембріональні клітини генетично досліджуються за допомогою методу karyomapping, який дає змогу непрямо й дуже точно з'ясувати, чи несе ембріон конкретну спадкову мутацію. Дослідження ґрунтується на порівнянні так званих генетичних маркерів (SNP — однонуклеотидних поліморфізмів), тобто ознак у ділянці навколо досліджуваного гена з референсними зразками ДНК батьків та іншого хворого/здорового члена родини.

Ці референсні зразки служать для створення індивідуальної генетичної «карти» родини. Завдяки цьому можна надійно визначити, чи ембріон успадкував здоровий або мутований варіант гена, без необхідності аналізувати сам ген так званою прямою детекцією. Цей непрямий підхід водночас суттєво знижує ризик так званого алельного drop-out (ADO), тобто ситуації, коли під час генетичного аналізу не була б виявлена одна з батьківських генетичних варіант, що могло б призвести до хибнонегативного результату.

Алельний drop-out (ADO) виникає внаслідок аналізу дуже малої кількості ДНК, отриманої з обмеженої кількості клітин ембріона. Під час лабораторної ампліфікації, тобто множення ДНК, може відбутися переважне посилення лише одного генетичного варіанта, тобто генетичної інформації тільки одного з батьків, тоді як генетична інформація, що походить від другого з батьків, залишається невиявленою.

Метод karyomapping забезпечує високу точність і надійність генетичного дослідження. Його додатковою перевагою є те, що він одночасно оцінює і кількість хромосом в ембріона, як при PGT-A, що дає змогу обрати ембріони з найвищим потенціалом для здорового розвитку та успішної вагітності.

Основні переваги PGT-M

PGT-M забезпечує індивідуально спрямований підхід до лікування безпліддя, який дає змогу обрати й перенести ембріони без досліджуваної генетичної мутації та водночас допомагає запобігти передачі серйозного спадкового захворювання наступним поколінням.

FAQ

Чи впливає забір клітин на розвиток ембріона?

Ні. Забирається лише кілька клітин із трофектодерми ембріона, тобто частини ембріона, з якої пізніше розвивається плацента, на стадії так званої хетчинг-бластоцисти.

Скільки часу триває генетичний аналіз?

Обробка й дослідження зразка ембріональної ДНК у генетичній лабораторії триває приблизно 3–5 тижнів залежно від обраного типу генетичного дослідження.

Чи підвищує PGT-A шанс на вагітність?

Так. Вибір ембріона з правильною кількістю хромосом підвищує шанс на успішне прикріплення в матці та знижує ризик викидня.

Чи покривається PGT медичним страхуванням?

Так, у пар із медичним показанням, наприклад при повторних викиднях, старшому віці або носійстві серйозної генетичної мутації, PGT покривається медичним страхуванням. В інших випадках оплата здійснюється відповідно до актуального прайс-листа клініки.

Декоративний елемент
Контактна особа

Віта Котовська

Телефон: +420 530 338 338 Email: info@reprogenesis.cz

Hlinky 144, 603 00 Brno, CZ

Потрібно більше інформації?
Зв'яжіться з нами!

IVF koordinátorky
Telefon: +420 530 338 338 E-mail: info@reprogenesis.cz

Hlinky 144, 603 00 Brno, CZ

Potřebujete více informací?
Ozvěte se nám!